DNase I, RNase-Free, HC
貨號/規格：E1018-A/1,000 U
濃度：50 U/μL
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產品簡介
DNase I（無(wu) RNase）是一(yi)種可酶切單鏈和(he)雙鏈 DNA 的(de)核(he)(he)酸內切酶。它(ta)水(shui)解磷酸二酯(zhi)鍵，產生帶有 5'-磷酸基(ji)團和(he) 3'-OH 基(ji)團的(de)單脫氧核(he)(he)糖核(he)(he)苷(gan)酸和(he)寡脫氧核(he)(he)糖核(he)(he)苷(gan)酸。
該酶的活性嚴格依賴于 Ca2+，由 Mg2+?或 Mn2+?離子活化。
在 Mg2+?存在時，DNase I 以統計意義上隨機的方式獨立切割 dsDNA 各鏈。Mn2+?存在(zai)時，該(gai)酶(mei)幾乎在(zai)同一位點切割兩(liang)(liang)條(tiao) DNA 鏈，產(chan)生帶有平末端或僅(jin)一或兩(liang)(liang)個(ge)核甘酸的突出端的 DNA 片段。
產品組成
| 組分 | E1018-A |
| DNase I, RNase-Free, HC?(50 U/μL) | 20 μL |
| 10X DNase I?Buffer (Mg2+?Plus) | 1 mL |
| EDTA (50 mM) | 1 mL |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli?菌株，含有編碼牛 DNase I 的克隆(long)基因。
單位定義
一個單位(wei)是指在37°C下1分鐘內完全降解 1 μg質粒 DNA所需的酶量(liang)。
在以下混合物(wu)中測定酶活性：
10 mM Tris-HCl（25°C 時 pH 7.5）、2.5 mM MgCl?2、0.1 mM CaCl?2、1 μg pUC19 DNA。一個 DNase I 單(dan)位(wei)相當于 0.3 Kunitz 單(dan)位(wei)。
特點
? 重組酶
? 從非動物宿主純化而來，內源性(xing) RNase 水平(ping)較低(di)
適用范圍
? 制備不含 DNA 的 RNA
? 體外(wai)轉錄后去除模板 DNA
? 在進行 RT-PCR 和 RT-qPCR 之(zhi)前制備無 DNA 的 RNA
? 與 DNA 聚合酶 I 配合，通過缺口平移進行 DNA 標記
??采(cai)用 DNase I（無 RNase）足跡法進行 DNA-蛋(dan)白相互作用研(yan)究
? 生成隨機重疊 DNA 插入片段文庫。使用含有 Mn2+?的反應緩沖液