T4 DNA Ligase, HC
貨號/規格：E1014-D/5,000 Weiss U
濃度：30 Weiss U/μL
?
產品簡介
T4 DNA Ligase催化(hua)雙(shuang)鏈(lian)(lian) DNA 或(huo)(huo) RNA 中并列的 5'-磷酸(suan)和(he) 3'-羥(qian)基末(mo)(mo)端之(zhi)間形成磷酸(suan)二(er)酯(zhi)鍵。該酶可修復雙(shuang)鏈(lian)(lian) DNA、RNA 或(huo)(huo) DNA/RNA 雜交體中的單鏈(lian)(lian)缺口，將 DNA 片段與粘性(xing)末(mo)(mo)端或(huo)(huo)平(ping)末(mo)(mo)端連(lian)接結合，但對單鏈(lian)(lian)核酸(suan)無活性(xing)。
T4 DNA 連接酶需(xu)要 ATP 作為(wei)輔因子。
產品組成
| 組分 | E1014-D |
| T4 DNA Ligase, HC (30 Weiss U/μL) | 167 μL |
| 10X T4 DNA Ligase?Buffer | 1.5 mL ×?5 |
| 50% PEG | 1.5 mL ×?5 |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli?菌株，含有從噬菌體 T4 克隆的基因(yin) 30。
單位定義
1個?Weiss 單位是指在 37°C 下 20 分鐘內催化 1 nmol 的 [32PPi] 轉化為可吸附形式所(suo)需(xu)的酶量(liang)。在以下混合物(wu)中測定(ding)酶活性：
66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl 2、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [32PPi]。1個?Weiss 單位相當于大(da)約 200 個粘性末端連(lian)接單位（CEU）。1個CEU是指在特定條件下（即在16°C下30分鐘內），將(jiang)λ（lambda）DNA的(de)HindIII片段連(lian)接達到50%所(suo)需的(de)酶量。
適用范圍
? 克隆限(xian)制性內切酶生成的 DNA 片段(duan)
??克隆 PCR 產物(wu)
? 將雙鏈(lian)寡核(he)苷酸連接子或接頭與(yu) DNA 相(xiang)連
? 定點突變
? 擴增片段長度多態性(xing) (AFLP)
? 連(lian)接酶介導的 RNA 檢測
? 雙螺旋 DNA、RNA 或(huo) DNA/RNA 雜交體中的缺口修復
? 線性 DNA 的自環化