T4 DNA Ligase, HC
貨號/規格：E1014-D/5,000 Weiss U
濃度：30 Weiss U/μL
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產品簡介
T4 DNA Ligase催化雙(shuang)鏈 DNA 或 RNA 中并列的 5'-磷酸和 3'-羥基末端之(zhi)間(jian)形成磷酸二酯(zhi)鍵(jian)。該酶可(ke)修(xiu)復(fu)雙(shuang)鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交體(ti)中的單(dan)鏈缺(que)口，將 DNA 片段與粘性(xing)末端或平末端連接結(jie)合，但對單(dan)鏈核酸無(wu)活性(xing)。
T4 DNA 連接(jie)酶需要 ATP 作為輔因子。
產品組成
| 組分 | E1014-D |
| T4 DNA Ligase, HC (30 Weiss U/μL) | 167 μL |
| 10X T4 DNA Ligase?Buffer | 1.5 mL ×?5 |
| 50% PEG | 1.5 mL ×?5 |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli?菌株，含有從噬菌體 T4 克隆的基因 30。
單位定義
1個?Weiss 單位是指在 37°C 下 20 分鐘內催化 1 nmol 的 [32PPi] 轉化為可吸附形式所需(xu)的酶量。在(zai)以下(xia)混合(he)物中測定酶活性：
66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl 2、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [32PPi]。1個?Weiss 單位相當于大(da)約 200 個粘性末(mo)端連(lian)接單位（CEU）。1個CEU是指(zhi)在(zai)特定條件下（即在(zai)16°C下30分鐘(zhong)內），將λ（lambda）DNA的(de)HindIII片段連(lian)接達到(dao)50%所需的(de)酶量。
適用范圍
? 克隆限制(zhi)性內切酶生(sheng)成的 DNA 片段
??克隆(long) PCR 產物
? 將(jiang)雙鏈(lian)寡核苷酸連接(jie)子(zi)或接(jie)頭與 DNA 相連
? 定點突變
? 擴增片段(duan)長度多態性 (AFLP)
? 連接酶介導的 RNA 檢測(ce)
? 雙螺旋(xuan) DNA、RNA 或(huo) DNA/RNA 雜交體中的缺(que)口修復
? 線性 DNA 的自(zi)環化(hua)