T4 DNA Ligase
貨號/規格：E1014-A/200 Weiss U; E1014-B/1,000 Weiss U; E1014-C/5,000 Weiss U
濃度：5 Weiss U/μL
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產品簡介
T4 DNA Ligase催化雙(shuang)(shuang)鏈 DNA 或 RNA 中(zhong)并列的 5'-磷酸和 3'-羥(qian)基末(mo)端之間(jian)形成磷酸二酯鍵。該(gai)酶可修復雙(shuang)(shuang)鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交(jiao)體中(zhong)的單鏈缺口，將 DNA 片段與粘性(xing)末(mo)端或平末(mo)端連接結(jie)合，但對(dui)單鏈核酸無活性(xing)。
T4 DNA 連接酶需要 ATP 作為輔因子。
產品組成
| 組分 | E1014-A | E1014-B | E1014-C |
| T4 DNA Ligase?(5 Weiss U/μL) | 40 μL | 200 μL | 200 μL ×?5 |
| 10X T4 DNA Ligase?Buffer | 0.5 mL | 1.5 mL | 1.5 mL ×?5 |
| 50% PEG | 0.3 mL | 1.5 mL | 1.5 mL ×?5 |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli?菌株，含(han)有(you)從噬菌體(ti) T4 克(ke)隆的基因(yin) 30。
單位定義
1個?Weiss 單位是指在 37°C 下 20 分鐘內催化 1 nmol 的 [32PPi] 轉化(hua)為可吸(xi)附(fu)形式所需的酶量。在以下混合物(wu)中測定酶活性：
66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl 2、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [32PPi]。1個(ge)(ge)?Weiss 單(dan)位相當于(yu)大約(yue) 200 個(ge)(ge)粘性末端連(lian)接單(dan)位（CEU）。1個(ge)(ge)CEU是指在特定條件下（即在16°C下30分(fen)鐘內），將(jiang)λ（lambda）DNA的HindIII片段連(lian)接達到(dao)50%所需的酶(mei)量(liang)。
適用范圍
? 克隆限制性內(nei)切(qie)酶生成(cheng)的 DNA 片段(duan)
??克隆 PCR 產(chan)物
? 將雙鏈寡核(he)苷酸連接子或接頭與 DNA 相(xiang)連
? 定點突變
? 擴增片段長度(du)多態(tai)性 (AFLP)
? 連(lian)接酶介導的 RNA 檢測(ce)
? 雙螺(luo)旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交體中的(de)缺口修(xiu)復
? 線性 DNA 的自環化