PowerScript RT SuperMix
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貨號/規格：R1081/100 rxns, R1082/500 rxns, R1083/2500 rxns
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產品說明
PowerScript RT SuperMix是一種優化的(de)5X逆(ni)轉錄混(hun)合物，包含兩步法RT- qPCR工作流(liu)程(cheng)中第一鏈cDNA合成(cheng)所需的(de)所有成(cheng)分。它含有耐(nai)熱性逆(ni)轉錄酶，支持(chi)在高溫下的(de)cDNA合成(cheng)。同(tong)時(shi)含有鼠源RNase抑制劑保護模板RNA不(bu)被降解。混(hun)合物中包含的(de)隨機六(liu)聚(ju)體和(he)Oligo dT引物，可以充分進行(xing)各類RNA的(de)逆(ni)轉錄。本品可對低(di)至(zhi)單拷(kao)貝的(de)RNA進行(xing)逆(ni)轉錄，產生的(de)cDNA產物是qPCR檢(jian)測(ce)的(de)理(li)想模板，保證檢(jian)測(ce)的(de)靈敏和(he)準確(que)。
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產品組分
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組分 |
R1081（100?rxns） |
R1082（500?rxns） |
R1083（2500?rxns） |
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PowerScript RT SuperMix? |
400 μL |
400 μL×5 |
10 mL |
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保存條件
-20℃保存(cun)，有效(xiao)期2年。
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適用范圍
第一鏈cDNA 合成
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注意事項
l?成功的(de)cDNA合成來自高(gao)(gao)質量(liang)的(de)RNA。高(gao)(gao)質量(liang)的(de)RNA至少應保(bao)證全長的(de)完(wan)整性并且不含(han)逆轉錄酶的(de)抑制劑，如EDTA或 SDS。
l?檢測所需的RNA量取決于感興(xing)趣轉錄物的豐度(du)。一般情(qing)況(kuang)下，建議總RNA為1?ng?~ 1 μg或(huo)mRNA 0.1?ng?~ 100 μg。
l?在(zai)操作過(guo)程中，注(zhu)意防止引入RNase導致RNA降解。RNA最好保(bao)存于-70℃，避免反復凍融。
l?基(ji)因組DNA或過量產品(pin)的存在會干擾目標RNA的準(zhun)確定量，特別(bie)是(shi)對(dui)(dui)于低(di)拷貝目標。無RT對(dui)(dui)照(zhao)反(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)可以通過將PowerScript RT SuperMix在95℃下熱失(shi)活1分鐘再添加(jia)模(mo)板RNA來(lai)模(mo)擬無逆轉(zhuan)錄反(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)；此外，應(ying)(ying)設置NTC（無模(mo)板對(dui)(dui)照(zhao)）反(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)，以證明(ming)逆轉(zhuan)錄反(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)是(shi)有意(yi)義的。
l?cDNA產物應置于-20℃或以(yi)下保(bao)存，避免反復凍融。