Fast DNA Library Plus Prep Kit?for MGI
使用說明書
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【產品名稱】
Fast DNA Library Plus Prep Kit?for MGI
【貨號/規格】
KM004-A（24?rxns）；KM004-B（96?rxns）；試用裝（6?rxns）
【產品簡述】
本試劑盒針對 MGI?高通量(liang)測序平臺，提供了(le)一管式便捷(jie)、通用(yong)的 DNA 文庫(ku)構建方(fang)案，將(jiang)片段化、末(mo)端補平和(he)末(mo)端加 A 結(jie)合到一個步(bu)驟，大大縮(suo)短了(le)建庫(ku)的時間(jian)、減少(shao)了(le)繁瑣步(bu)驟造成的誤差，片段化和(he)末(mo)端修復后的產物可(ke)直(zhi)接(jie)進行接(jie)頭連接(jie)，不需額外純化，后續操作和(he)#KM001 Fast DNA Library Prep Kit?for MGI操作相同。完整(zheng)的文庫(ku)定(ding)量(liang)可(ke)將(jiang)文庫(ku)稀釋至合適(shi)濃(nong)度(du)，用(yong)雙鏈(lian) DNA 熒光染料方(fang)法（如Thermo Qubit Flex Fluorometer）或 qPCR 絕對定(ding)量(liang)方(fang)法。
【樣本類型】
表(biao) 1 常用DNA推薦投入量(liang)
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應用 |
樣本類型 |
推薦投入量 |
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全基因組測序 |
高質量復雜基因組 |
50ng-1μg |
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全(quan)外顯(xian)子靶向捕獲測序 |
高質量復雜基因組 |
10ng-1μg |
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全(quan)基因組靶向捕獲測序(xu) |
FFPE DNA |
≥50ng |
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全基因組測序 |
微生物基因組 |
1ng-1μg |
推薦使用 TE 或超純(chun)水(shui)溶解(jie) DNA 樣品(pin)，如(ru)樣品(pin)中含有 EDTA，則需磁珠純(chun)化(hua)或加入一定體積的 Neutralization Buffer 中和。
【儲存條件及有效期】
所有試劑均應保(bao)存于-20℃，Ligation Buffer 在低(di)溫下會有晶體析(xi)出，屬正常(chang)現象(xiang)， 應平衡(heng)至室溫后使用，產(chan)品有效(xiao)期為 12 個月(yue)。
【組成成分】
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組分 |
24 rxns |
96 rxns |
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FEP Buffer |
120?μl |
480?μl |
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FEP Enzyme Mix |
240?μl |
2×480?μl |
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Fast DNA Ligase |
120?μl |
2×240?μl |
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Fast Ligation Buffer |
600?μl |
4×600?μl |
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2× HIFI Library PCR Master Mix |
600?μl |
4×600?μl |
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Primer Mix?for MGI * |
120?μl |
480?μl |
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Neutralization Buffer |
120?μl |
480?μl |
*FEP Buffer 為片段化、末端修(xiu)復的反應 buffer，FEP Enzyme Mix 為片段化、末端修(xiu)復相關(guan)酶(mei)混合物(wu)。
*若有(you)多個樣本(ben)，則推薦使用#KM002 和#KM003 接頭引物組合，本(ben)試(shi)劑盒(he)提供(gong)一套引物，引物序列(lie)如下(xia)：
5’-TGTGAGCCAAGGAGTTG-3’
5’-GAACGACATGGCTACGA-3’
備注(zhu)：分選磁珠推薦(jian)使用#NC1011 GDSPure?DNA Selection Magbeads 或 AMPure XP beads。