RNase A
BR級，僅供研究使用(yong)
貨號：N9047
規格：1g
比(bi)活性：≥3000U/mg蛋(dan)(dan)白（≥60Kunitz單位(wei)/mg蛋(dan)(dan)白）。
形(xing)式：含有1 g RNase A，凍干粉末
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產品說明
RNase A是(shi)一種內切(qie)核(he)糖(tang)核(he)酸(suan)(suan)(suan)酶(mei)(mei)，分(fen)子量(liang)為13.7 kDa（單體），可在C和U殘基位置特異性降解單鏈(lian)RNA。該酶(mei)(mei)可以切(qie)割(ge)核(he)苷(gan)酸(suan)(suan)(suan)5’-核(he)糖(tang)與鄰近嘧啶核(he)苷(gan)3’-核(he)糖(tang)上磷(lin)酸(suan)(suan)(suan)基團(tuan)之(zhi)間的磷(lin)酸(suan)(suan)(suan)二酯鍵，產生的2’, 3’-環磷(lin)酸(suan)(suan)(suan)可以水解成相應的3’-核(he)苷(gan)磷(lin)酸(suan)(suan)(suan)鹽(yan)。
RNase A推薦工作濃(nong)度1-100?μg/ml，因應(ying)用類型的(de)不同而異(yi)(yi)。該酶在多種反應(ying)條(tiao)件下均有活(huo)性(xing)。低鹽離子(zi)濃(nong)度時（0-100 mM NaCl），RNase A可以切割單(dan)鏈(lian)RNA、雙(shuang)鏈(lian)RNA、以及(ji)RNA/DNA雜(za)合子(zi)中的(de)RNA；然而，當NaCl濃(nong)度大(da)于(yu)300 mM時，RNase A則(ze)特異(yi)(yi)性(xing)切割單(dan)鏈(lian)RNA。
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應用
——質粒和基因(yin)組DNA的制備(bei)
——從重(zhong)組蛋白制劑(ji)中去除RNA
——核糖核酸酶保護(hu)試(shi)驗
——定位DNA或RNA中的單堿基突變
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保存條件
4℃保(bao)存。在(zai)密封和干燥條件(jian)下儲存的保(bao)質期為三年。RNase A粉(fen)末可在(zai)室溫下運輸。
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質量控制
功(gong)能(neng)檢測方(fang)法為質粒(li)DNA提取過程中的RNA降解。
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活性單位的定義
當酵(jiao)母(mu)RNA在37°C和pH 5.0下被水(shui)解時，一個單位的酶在260 nm處導致吸光(guang)度增(zeng)加1.0。
50U大約相當于1個Kunitz單位。
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抑制和失活
-抑制劑：最有效的抑制劑是來自哺乳動物細胞細胞質中的~50 kDa蛋白，如核boLock?RNase抑制劑。
-其他抑制劑：尿(niao)苷2’,3’-環釩酸(suan)鹽(yan)、5’-二磷(lin)(lin)酸(suan)腺(xian)苷3’-磷(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)和(he)5’-二磷(lin)(lin)酸(suan)腺(xian)苷2’-磷(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)(2)、SDS、焦碳酸(suan)二乙(yi)(yi)酯、4M胸(xiong)氰酸(suan)胍加0.1M?2-巰基乙(yi)(yi)醇和(he)重金屬離子。
-用苯酚/氯仿(fang)萃取法滅活(huo)。
-在(zai)95°C下加熱10分鐘后滅活。
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本(ben)品僅(jin)供科(ke)學研究使用。
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